乙肝主要通过血液、不安全的注射、母婴传播以及性传播。近年对献血源进行严格筛查，经血传播乙型肝炎已经较少发生。有效预防乙肝感染方法—切断乙肝传播途径。大力推广安全注射，如针灸的针具建议一人一针，严格准守医院感染管理的标准；服务行业所用的理发、刮脸、修脚、纹身的刀具需要严格消毒；注意个人卫生，不和任何人共用剃须刀和牙具等用品。
进行正确的性教育，若性伴侣为HBsAg阳性者，应接种乙型肝炎疫苗或采用安全套；在性伙伴健康状况不明的情况下，一定要使用安全套以预防乙型肝炎及其他血源性或性传播疾病；对HBsAg阳性的孕妇，应避免羊膜腔穿刺，并缩短分娩时间，保证胎盘的完整性，尽量减少新生儿暴露于母血的机会。
乙肝病毒在外环境中的抵抗力很强，一般在37℃下可稳定60分钟；一般的化学消毒剂或温度60℃以上4小时都无法将其灭活；只有煮沸10分钟或高压蒸汽121℃消毒10分钟，或加热65℃10小时，才有将其杀灭的可能。含氯制剂、环氧乙烷、戊二醛、过氧乙酸和碘伏等也有较好的灭活效果。乙肝病毒侵入肝细胞后，形成共价闭合环状DNA(cccDNA),难以从体内彻底消除，这就是为什么好多病人转为慢性的原因。
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