英立达/阿昔替尼在胶质母细胞瘤中的单药疗效

　　尽管目前的临床试验未能证明总生存期延长，但抗血管生成疗法对于高度血管性和恶性脑肿瘤胶质母细胞瘤 (GBM) 来说是一种很有前景的治疗策略。靶向血管内皮生长因子受体的小分子酪氨酸激酶抑制剂阿昔替尼（英立达），有效抑制血管生成，在非小细胞肺癌、甲状腺癌和晚期肾细胞癌中具有单药临床活性。在这里，我们显示阿昔替尼对许多患者来源的 GBM 干细胞 (GSC) 和内皮细胞系发挥直接的细胞毒活性，并在体外抑制内皮管形成。阿昔替尼治疗患有由人 U87 神经胶质瘤细胞产生的高血管颅内肿瘤的小鼠，MGG4 GSCs 和小鼠 005 GSCs 显着延长了与肿瘤相关血管减少相关的生存期。因此，我们首次在临床前原位 GBM 模型（包括临床相关的 GSC 模型）中展示了阿西替尼全身性单药治疗提供的抗血管生成作用和延长生存期。这些结果支持进一步研究阿昔替尼作为 GBM 的抗血管生成剂。

　　在这项研究中，我们首次展示了 VEGFR TKI 阿昔替尼具有抗血管生成活性并延长了原位 GBM 小鼠的存活时间。阿昔替尼的治疗活性在三种高血管脑内 GBM 模型中得到证实：常规 U87 神经胶质瘤、MGG4 GSCs 和小鼠 005 GSCs。

　　我们的体外研究表明，阿昔替尼（英立达）不仅抑制内皮细胞的活力，而且抑制从四名患者中的三名分离出的 GSC，其敏感性范围为 0.06-6 μM。阿昔替尼先前被证明可在体外抑制 9L 大鼠胶质肉瘤细胞的生长。尽管传统上 VEGFR2 被认为是一种内皮特异性蛋白，但最近的研究描述了一种自分泌 VEGF-VEGFR2-Neuropilin-1 信号通路，可促进 GSC 活力和肿瘤生长。因此，观察到的由阿昔替尼介导的细胞毒性作用，包括球体形成抑制和细胞凋亡诱导，可能是通过其对 VEGFR 的抑制。值得注意的是，MGG8 GSC 对阿昔替尼最敏感，这可能是由于 MGG8 对 PDGFR 有抑制作用。PDGFRA基因扩增。相比之下，U87 对阿昔替尼具有相对耐药性。与分化程度更高的 GBM 细胞相比，研究未分化的 GSC 是否对阿昔替尼的直接影响更敏感将是有意义的。

　　在皮下肿瘤模型中，阿昔替尼（英立达）治疗抑制了大鼠 9L、人类 U87和 U251 胶质瘤的生长，尽管在停止阿昔替尼治疗后肿瘤生长恢复。为了评估阿昔替尼对位于大脑中的肿瘤的抗血管生成和抗肿瘤作用，我们选择了三个高度血管化的原位 GBM 模型。在常用的 U87 模型中，每日阿西替尼治疗显着降低了肿瘤相关微血管密度并延长了生存期。MGG4 GSC 衍生的肿瘤模型显示出频繁的异常扩张和扭曲的血管和肿瘤内出血，这是人类 GBM 的血管标志。CD34 内皮染色在 MGG4 和 005 模型中也显示了阿昔替尼介导的抗血管生成作用。虽然通过阿西替尼治疗在所有三种原位 GBM 模型中的存活率都显着延长，但效果并不明显。这表明尽管在这些血管肿瘤中对血管生成有很强的抑制作用，但肿瘤的生长并不依赖于新血管的形成。在 MGG4 模型中，MGG4 GSCs 在体外对阿昔替尼敏感，对肿瘤细胞的直接影响和对肿瘤脉管系统的抑制都可能有助于生存获益。

　　尽管阿昔替尼（英立达）延长了生存期，但在任何测试的模型中都没有获得长期的疾病控制或治愈，尽管新血管形成大幅减少。这表明临床使用阿昔替尼作为 GBM 的单一疗法在延长总生存期方面无效。与其他治疗方式的组合方法可能能够克服抗血管生成策略的限制并提高疗效。然而，选择具有 VEGFR TKI 的组合伙伴需要谨慎，因为节拍环磷酰胺化疗诱导的皮下神经胶质瘤肿瘤消退被阿昔替尼抑制，这是由于抑制先天性抗肿瘤免疫细胞募集。我们之前表明，贝伐单抗介导的血管通透性降低增强了瘤内注射治疗性溶瘤单纯疱疹病毒 (oHSV) 的分布 。当全身性贝伐单抗与表达抗血管生成血管抑制素 (G47Δ-mAngio) 的 oHSV 联合使用时，携带脑内 U87 GBM 的小鼠的存活率显着增加。研究阿昔替尼和 oHSV 在 GSC 衍生的原位 GBM 模型中是否具有相似的协同效应将是有意义的。

　　总之，我们首次表明，在三个临床前原位 GBM 模型中，每天使用阿昔替尼（英立达）进行全身性治疗显着抑制了 GBM 相关的血管生成并适度延长了生存期。这些结果支持进一步研究阿昔替尼作为 GBM 的抗血管生成剂。微信扫描下方二维码了解更多：