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新冠药物法匹拉韦(Favipiravir)耐药JUNV突变体的生长动力学

时间:2022-11-16 11:40 来源:康安途 作者:康安途医疗宋萍

  法匹拉韦也是目前已知一款对于流感病毒有着非常不错疗效的药物,这款药物在临床上已经对于多种流感具有非常好的疗效。这也是国外对于新冠治疗的主要药物,这款药的效果也不止存在于新冠,对于其他类型的病毒也具有作用。

法匹拉韦

  新冠药物法匹拉韦(Favipiravir)耐药JUNV突变体的生长动力学

  在JUNV耐药性试验中,在没有法匹拉韦的情况下,比较了念珠菌#1-res(P11)与亲本念珠菌#1(P0)的生长动力学。病毒在冰上吸附以同步感染后,孵育感染了Candid#1或Candid#1-res的293T细胞,并以hpi收集培养上清液。通过斑块测定法测定培养物上清液中的病毒滴度。在8 hpi下观察到Candid#1-res的有效复制,然而,两种病毒在28 hpi时的滴度之间没有显着差异,表明Candid#1-res表现出快速增长。未观察到斑块形态的差异。

  为了了解JUNV获得对法匹拉韦耐药的机制,评估了法匹拉韦存在下Candid#1和Candid#1-res的突变频率。根据已被证明足够灵敏的既定方法,通过靶向少至100个碱基对的区域来区分保真度差异,前293T细胞感染Candid#1或Candid#1-res(MOI:0.1),并在20μM法匹拉韦存在下孵育。48小时后,收集培养物上清液。接下来,从每种病毒克隆了NP基因的相同区域并进行克隆测序。之所以选择核蛋白(NP)基因,是因为它在病毒复制过程中极易发生突变,因此,可以估计每种病毒的基线错误率。对亲本Candid#1总共24,300个核苷酸和Candid#1-res的27,450个核苷酸的突变分析表明,耐药突变体每10,000个核苷酸获得1.82个突变,而亲本群体的8.64个突变(低4.7倍。P=0.0053,曼-惠特尼U检验),表明Candid#1-res病毒的保真度更高。同样,DMSO处理的对照组中Candid#1-res的突变频率略低(3.8倍),尽管数据缺乏统计学意义(P=0.242,Mann-Whitney U检验)。已知突变率增加3-5倍可导致致死性诱变。因此,估计在亲本Candid#1中观察到的法匹拉韦诱导突变的频率超出了胡宁病毒错误灾难的可容忍阈值。这与其他病毒的报道相当,包括流感、裂谷热、寨卡病毒和用法匹拉韦治疗的鼠诺如病毒。这些数据表明,具有致命后果的诱变是法匹拉韦抗病毒作用针对JUNV的主要机制。

  接下来,对替代进行了分类,以确定转换与转换的比例。法匹拉韦最常见的突变是G至A突变,其次是T和C突变,占法匹拉韦治疗病毒中所有替代的80%,表明法匹拉韦诱导的突变谱偏向过渡.这与用法匹拉韦治疗的其他病毒的研究一致。与文献一致,补充嘌呤而不是嘧啶类药物可逆转法匹拉韦的抗病毒活性,重申了法匹拉韦作为嘌呤类似物的作用,在核苷酸掺入期间与腺苷和鸟苷竞争。这反过来又解释了在法匹拉韦诱导的突变谱中观察到的错误偏差。

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(责任编辑:康安途医疗-目里里)
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