瑞戈非尼/瑞格非尼在结直肠癌中的抗肿瘤和抗转移活性

　　瑞戈非尼/瑞格非尼是一种新型多激酶抑制剂，最近证明了转移性结直肠癌 (CRC) 患者的总体生存获益。我们的研究旨在进一步了解瑞戈非尼的分子机制并评估其在联合治疗中的潜力。在患者来源 (PD) CRC 模型和鼠 CRC 肝转移模型中单独测试了瑞戈非尼并与伊立替康联合测试。使用体外研究了作用机制功能测定、免疫组织化学和与 CRC 相关癌基因的相关性。瑞戈非尼显示出显着抑制生长因子介导的血管内皮生长因子受体 (VEGFR) 2 和 VEGFR3 自磷酸化，以及人脐带血管内皮细胞 (HuVEC) 和淋巴管内皮细胞 (LEC) 中的细胞内 VEGFR3 信号传导，并阻止 LEC 的迁移.此外，瑞戈非尼抑制了 25 个人类 CRC 细胞系中的 19 个细胞系的增殖，并显着减缓了七个 PD 异种移植模型中的五个模型的肿瘤生长。在四种异种移植模型中延长治疗后，瑞戈非尼与伊立替康的组合显着延迟了肿瘤生长。CD31 染色减少表明瑞戈非尼的抗血管生成作用有助于其抗肿瘤活性。最后，瑞戈非尼通过抑制已建立的肝转移的生长和防止其他器官中新转移的形成，显着延迟了鼠 CRC 肝转移模型中的疾病进展。此外，我们的结果表明，瑞戈非尼显示出抗转移活性，这可能有助于其在转移性结直肠癌患者中的疗效。瑞戈非尼和伊立替康的组合显示出增强的抗肿瘤作用，并可能为 CRC 患者提供未来的治疗选择。

　　瑞戈非尼/瑞格非尼是一种具有抗血管生成活性的多激酶抑制剂，最近在美国和欧洲被批准用于治疗先前治疗失败的转移性结直肠癌患者。在这里，由该药物的发现者拜耳制药公司领导的一个研究小组证实，抑制血管生成和淋巴管生成的关键介质（VEGFR2 和 VEGFR3）是该药物潜在的抗血管生成作用机制。瑞戈非尼进一步抑制了已建立的肝转移灶的生长并阻止了新肝转移灶的形成，并且与化疗药物伊立替康联合使用可导致四种源自患者的结直肠癌异种移植模型的肿瘤生长显着延迟。

　　瑞戈非尼/瑞格非尼是一种新型多激酶抑制剂，在 CRC 的 PD 模型中，当以与人类治疗剂量相当的剂量单独给药或与伊立替康（后者接近鼠的最大耐受量）联合给药时，可介导肿瘤生长抑制并延迟肿瘤生长时间剂量）。此外，在 CRC 肝转移的小鼠模型中，瑞戈非尼显示出抗转移潜力。观察到的抗血管生成作用被认为是导致肿瘤生长迟缓的原因，可能是通过瑞戈非尼的协同激酶抑制作用。特别是，瑞戈非尼抑制 VEGFR2 和 VEGFR3，这两者都是 CRC 生长和转移中血管生成和淋巴管生成的重要介质。

　　VEGFR2 和 VEGFR3 的自磷酸化分别在人血管和淋巴细胞中被瑞戈非尼抑制。对于 VEGFR2，IC50范围类似于最近来自生化和细胞激酶测定以及 VEGF-A 刺激的 HuVEC 增殖测定的数据。尽管使用了三种不同的磷酸酪氨酸特异性 VEGFR2 抗体，但瑞戈非尼的 IC50值在研究之间相似。在我们的研究中，我们使用了针对VEGFR2 的pY1175的抗体，先前已证明其被 src 激酶磷酸化。由于 src 激酶在所用浓度下不受瑞戈非尼的抑制，Y1175 的抑制作用磷酸化是通过抑制 Y1054/1059间接介导的，这会阻止 src 结合而不是直接抑制 src。我们之前在生化和细胞激酶测定中分别报道了瑞戈非尼介导的 VEGFR3 自磷酸化抑制作用，IC50值分别为 46 和 135 nmol/L。在这些研究中，鼠 VEGFR3 在人 HEK293 细胞中表达后直接用于生化分析或替代系统。这可以解释我们当前和以前的发现之间的差异。

　　从机制上讲，瑞戈非尼和伊立替康的联合作用可以通过瑞戈非尼介导的肿瘤血管系统正常化来解释，这可以提高伊立替康对肿瘤的可及性。一项临床前研究表明，在 CRC 模型中，节拍式给药伊立替康和与 VEGFR2 抑制剂 semaxanib 的协同作用具有抗血管生成作用。在该研究中观察到微血管密度降低和抗血管生成因子血小板反应蛋白-1 的表达增加。其他可能的解释包括对肿瘤灌注和缺氧诱导的不同影响。事实上，如动态对比增强磁共振成像所示，瑞戈非尼在大鼠胶质母细胞瘤肿瘤中迅速且长期地降低血管通透性过高。

　　总之，这些研究的结果证明了瑞戈非尼/瑞格非尼靶向 CRC 并提供抗转移作用的潜力，这可能有助于在转移性 CRC 患者的 III 期研究中观察到的总体生存获益。PD CRC 异种移植物的使用为未来的临床开发策略提供了一些基本原理。这些模型的详细遗传特征将进一步深入了解瑞戈非尼和其他潜在 CRC 疗法的作用机制。微信扫描下方二维码了解更多：