NS5B蛋白即RNA依赖的RNA聚合酶，负责催化HCV RNA链的合成，形成新的HCV。NS5B核苷酸聚合酶抑制剂通过直接抑制RNA聚合酶活性干扰HCV复制过程，达到清除病毒的目的。NS5B核苷酸聚合酶抑制剂的优势在于，在各个基因型的HCV中，RNA聚合酶的序列高度保守，因此NS5B核苷酸聚合酶抑制剂适用于所有基因型的HCV感染，属于广谱抗HCV药物。同时，此类DAA的耐药基因屏障较高。索非布韦（Sofosbuvir）是目前NS5B聚合酶抑制剂的唯一药物。
需要注意的是，索非布韦80%经尿液排泄，且血液透析可以清除超过53%的索非布韦代谢物，因此对重度肾功能不全患者［估算肾小球滤过率（eGFR）＜30ml·min^-1·1.73 m^-2］及需要血液透析的终末期肾病患者需要调整SOF剂量。肾移植患者于DAA治疗前应评估DAA方案与免疫抑制剂等药物相互作用风险，建议eGFR≥30 ml·min^-1·1.73 m^-2者使用。
建议推荐采用泛基因型DAA方案治疗所有HCV RNA阳性患者。但应注意，泛基因型方案对于有些基因型（如基因3b型）特别是伴有肝硬化者，疗效仍不够理想；对于失代偿期肝硬化者不宜应用含有蛋白酶抑制剂的方案；对于终末期肾病者，应慎用含有索非布韦的方案。
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